PRACTICA 1: PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO EN TUBO Y PLACA.

PRACTICA NUMERO 1

26/09/17-29/09/17

OBJETIVOS:

Preparar nuevos medio de cultivos para poder realizar siembras en el.

UTILIDAD CLÍNICA:

Esta accion se realiza porque al ser nuevo medio los microorganismos proliferan mejor que en un medio antiguo.

FUNDAMENTOS:

Un medio de cultivo es una técnica de laboratorio que consta de un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. Según lo que se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado sólido, semisólido o líquido. El objetivo último del cultivo es variado: antibiograma, identificación, multiplicación.

APARATAJE:

-Placa calefactora.

-Mechero Bunsen.

-Autoclave.

MATERIALES:

-Balanza.

-Vidrio de reloj o papel de aluminio.

-Espatula.

-Agua destilada.

-Probeta.

-Pipetas y puntas de pipeta.

-Matraz erlenmeyer.

-Iman y varilla recoge imanes.

-Placas de petri.

REACTIVOS:

-TSA.

PROCEDIMIENTO:

Preparacion en medio solido

-Pesar 4 gr de TSA en la balanza con un vidrio de reloj.

-Medir en la probeta 10 ml de agua destilada.

-Mezclar en el matraz los 4g de TSA con los 10 ml de agua destilada.

-Colocar en la placa calefactora el matraz durante 10 minutos a 100ºC.

-Dentro del matraz se introduce un iman para que ayude a disolver el TSA dentro del agua destilada.

-Cuando se a disuelto completamente el TSA en el matraz, etiquetarlo y colocarle un tapon e introducirlo en el autoclave.

-Cuando el medio a sido esterilizado por el autoclave, se saca y en la mesa creamos un medio esteril con un mechero bunsen.

-A continuacion el medio que hay en el matraz se emplaca en las placas petri.

-Dejamos que el medio solidifique e invertimos las placas.

Preparacion de medio solido en tubo (slant)

- Pesamos el medio de cultivo y rehidratamos con agua destilada en un matraz Erlenmeyer.

-Fundimos el medio de cultivo en una placa calefactora-agitadora. El medio debe hervir hasta que se vuelva transparente. Tapamos el matraz con un tapón y dejamos enfriar hasta 45-50ºC

- Distribuimos rápidamente el medio en los tubos antes de que comience a solidificar. Para ello se empleará una pipeta y los tubos no se llenarán más de un tercio de su volumen. Tapamos, con su correspondiente tapón, cada uno de los tubos.

-Autoclavamos.

-  Lo sacamos del autoclave y lo dejamos enfriar inclinando ligeramente los tubos para obtener los tubos en “pico de flauta” o “slant”.

RESULTADOS: