PRACTICA 6: TINCION DE GRAM.

diciembre 14, 2017

PRACTICA NUMERO 6

24/10/17

OBJETIVO:

La tinción de Gram se utiliza para la visualización de bacterias. Se utiliza tanto para la morfología como para diferenciar las bacterias Gram positivas de las Gram negativas. Positivas azules y negativas rojas.

FUNDAMENTOS:

-Diferenciar las bacterias Gram (+) de las Gram (-) en función de la distinta composición de su pared bacteriana.

-Realizar correctamente diferentes técnicas de tinción con el fin de obtener resultados óptimos.

-Observar las bacterias Gram (+) teñidas de azul o violeta

-Observar las bacterias Gram (-) teñidas de rojo o rosa.

-Visualizar la morfología y disposición de las bacterias presentes en las muestra.

MATERIALES:

Portaobjetos
Microscopio
Mechero Bunsen
Paralelas
Frasco lavador
Pipetas pasteur
Asas de siembra de Platino

REACTIVOS:

Cristal Violeta (GRAM 1)
Lugol
Agua destilada
Decolorante (alcohol-acetona).
Colorante de contraste Safarina.(GRAM2)

PROCEDIMIENTO:

1. Extensión desecación y fijación.

a) En un porta depositamos una gota de agua destilada estéril, con ayuda de una pipeta Pasteur también estéril.

b) Flameamos la asa de siembra, enfriamos en el borde de la placa de petri (interior), cogemos una colonia (sin apretar mucho ya que te llevarías más cantidad de la deseada).

c) Posteriormente, depositamos el asa de siembra en la gota de agua del porta, y con movimientos circulares vamos depositando la colonia.

d) Secamos por encima de la llama del mechero bunsen (que ha estado encendido todo el procedimiento, para trabajar en un ambiente de asepsia).

e) Una vez seco, procedemos a fijarlo, acostumbrados a fijarlo con metanol esta vez será en la misma llama. Se pasa 3 veces por lo azul de la llama, y se deja enfriar antes de pasarlo por el colorante.
f) Ya frío el portal, lo ponemos en las barras paralelas