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PRACTICA 16: ESTUDIO DE ROTAVIRUS POR INMUNOCROMATOGRAFIA.

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PRACTICA NUMERO 16 15/02/2018 OBJETIVO: Averiguar mediante una inmunocromatografia la presencia de rotavirus en heces. UTILIDAD CLINICA: El test rapido Nadal para Rotavirus es un inmunoensayo cromatografico para la deteccion cualitativa del rotavirus en muestras de heces como ayuda al diagnostico de una infeccion por rotavirus. FUNDAMENTOS: En este ensayo el Rotavirus se detecta con la ayuda de anticuerpos especificos. Tras añadir la muestra contenida en el bufer a la muestra fecal, un anticuerpo especifico marcado con color se liga al cirus, si esta presente en la muestra. MATERIALES : 1 pipeta desechable. 1 tubo con bufer para la recoleccion de muestra. 1 Nadal de test . PROCEDIMIENTO: 1.Llevar el test y la muestra de heces a temperatura ambiente antes su realización. 2.Sacar el dispositivo de su envoltorio y coloquelar sobre una superficie limpia y plana. 3.Coger una muestra de heces y agitar bien el tubo para mezclar totalme
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PRACTICA 15: PRUEBA GRAM + DE LOS SENTIDOS.

PRACTICA NUMERO 15 13/02/2018 REACTIVOS: Inoculo Test. MATERIALES: Orina. Mechero. Pipeta y puntas de pipeta. SSF. Placa de dilucion. Asa de siembra. Parafilm. PROCEDIMIENTO: 1.Realizamos la resiembra en SSF cogiendo una porcion de Epidermidis. 2. Pasar 200 ul del inoculo y añadirlo al test del kit. 3.Echar en cada pocillo del test inoculo.
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PRACTICA 14: UROCULTIVO Y LAMINOCULTIVO.

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PRACTICA NUMERO 14 OBJETIVO: Vamos a realizar un urocultivo para la determinación de diferentes microorganismos presentes en la muestra de orina. Sirve para el diagnostico de las posibles enfermedades o infecciones urinarias. MATERIALES  Asas de siembra desechables Placa de Petri con medio CLED, McConkey, EMB o Cromógenos:     .  CLED : medio diferencial, la siembra se realiza con un asa calibrada. La mitad de la placa se utiliza para la cuantificación y la otra mitad para aislamiento.     .  McConkey : medio selectivo para enterobacterias en el cual la siembra se siembra mediante agotamiento de estrías para obtener aislamiento de colonias.    -Muestra: orina   Estufa PROCEDIMIENTO: 1. Introducir el asa de siembra en la muestra de orina, y hacer una siembra mediante el siguiente método, Utilizamos un medio CLED y un medio McConckey. 2. Incubar a 37ºC durante 18/24 horas. R ESULTADOS: - Urocultivo Negativo: < 1.000 UFC/mL o "
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PRACTICA 13: ANTIBIOGRAMA

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PRACTIA NUMERO 13 8/02/2018 OBJETIVO: El Antibiograma es un conjunto de técnicas para determinar en in vitro el graso de sensibilidad de los microorganismos frente a la acción de distintos agentes anti microbianos. FUNDAMENTO: Las pruebas mas utilizadas se basan en el enfrentamiento in vitro del microorganismo, aislado de una muestra biológica, con distintas concentraciones del anti microbiano. APARATAJE: Estufa MATERIALES: Asas esteriles. Muestra aislada. Medio Müeller-Hinton PROCEDIMIENTO: 1.Sembrar la bacteria en solucion salina. 2.Sembrar en la placa de Müeller-Hinton por agotamiento de estrias. 3.Despues añadir un disco de Colistin, toblamicina, gentamicin, colamicin y amoxicilina. 4.Por ultimo introducir en la estufa con un periodo de incubacion de 18-24 horas y observar el halo posteriormente. RESULTADOS: Sensible a CL 10 y AMC 30 Resistente a NN10, GM 10 y C30. Los calculos que he realizado para obtener cual es sens
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PRACTICA 12: API 20 E Y 10 S

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PRACTICA NUMERO 12 16/01/2018 OBJETIVO: Identificar una bacteria mediante la tecnica de Sistema de identificacion de Enterobacteriaceae y otros bacilos Gram negativos no exigentes. UTILIDAD CLÍNICA: API 20 E es un sistema estandarizado que permite la identificacion de Enterobacteriaceae y otros gram negativos no exigentes, que incluye 21 test bioquimicos miniaturizados, asi como una base de datos. La lista completa de las bacterias posibles de identificar con este sistema se presenta en la tabla de identificacion al final de la presente ficha tecnica. FUNDAMENTOS: La galeria del sistema API 20 E se compone de 20 microtubos que contienen los substratos deshidratados. Los microtubos se inoculan con una suspension bacteriana que reconstituye los test. Las reacciones producidas durante el periodo de incubacion se traducen en cambios de color espontaneos o revelados mediante la adicion de reactivos. APARATAJE: Estufa. MATERIALES: Pipetas. Gradi
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PRACTICA 11: PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA.

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PRACTICA NUMERO 11 9/01/2018 OBJETIVOS: Realizar pruebas bioquímicas para poder realizar la identificación de bacilos Gram -. UTILIDAD CLÍNICA: Estas pruebas de identificación se realizan para poder distinguir entre: -Microorganismos que crecen en medios no enriquecidos y medios para enterobacterias, al grupo de las enterobacterias o al grupo de los no fermentadores de azucares. Ej: Pseudonomas. -Otras bacterias, que se aíslan solo como resultado de una búsqueda especifica, utilizando medios especiales; Vibrio y Campylobacter, Brucella, Bordetella y Legionella. FUNDAMENTOS: Los principios y reacciones en que se basan las pruebas bioquímicas son las siguientes: -Kligler: esta prueba permite la diferenciación de enterobacterias. Esta compuesto por hierro. Es un medio solido y contiene lactosa, glucosa, peptonas y un indicador de pH. Vira a amarillo cuando el pH es ácido y que toma un color rojo mas intenso cuando el pH es alcalino. La fermentación
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PRACTICA 10: IDENTIFICACION DE COCOS GRAM +

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PRACTICA NUMERO 10 28/11/17 OBJETIVOS: Poder identificar cocos gram + que pueden ser micrococus, staphilococus, aureus. MATERIALES: -Asas de siembra. -Portaobjetos. -Agua oxigenada. PROCEDIMIENTO: Catalasa: -Primero para identificar si es un coco gram + se realiza la catalasa: -Sobre un portaobjetos se deposita una colonia de 24 h., se añade una gota de H2O2  al 3%, sin mezclar con el asa y sin invertir el orden. - El inmediato desprendimiento de burbujas se considera una prueba positiva. - Las colonias se deben tomar de un medio sin sangre ya que los eritrocitos tienen actividad de catalasa y pueden falsear los resultados. - Esta prueba también puede realizarse en tubo. *El resultado es POSITIVO * -Como la catalasa es positiva se realiza: Oxido-fermentacion: -Se siembra la muestra, en picadura, en dos tubos que contienen el medio de Hugh Leifson  (O/F) adicionado de un 1% glucosa. -A uno de los tubos se añade parafin
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