PRACTICA 14: UROCULTIVO Y LAMINOCULTIVO.

PRACTICA NUMERO 14

OBJETIVO:

Vamos a realizar un urocultivo para la determinación de diferentes microorganismos presentes en la muestra de orina. Sirve para el diagnostico de las posibles enfermedades o infecciones urinarias.

MATERIALES

•  Asas de siembra desechables
• Placa de Petri con medio CLED, McConkey, EMB o Cromógenos:
•     . CLED: medio diferencial, la siembra se realiza con un asa calibrada. La mitad de la placa se utiliza para la cuantificación y la otra mitad para aislamiento.
•     . McConkey: medio selectivo para enterobacterias en el cual la siembra se siembra mediante agotamiento de estrías para obtener aislamiento de colonias.  
• -Muestra: orina 
•  Estufa

PROCEDIMIENTO:

1. Introducir el asa de siembra en la muestra de orina, y hacer una siembra mediante el siguiente método,Utilizamos un medio CLED y un medio McConckey.

2. Incubar a 37ºC durante 18/24 horas.

RESULTADOS:

- Urocultivo Negativo: < 1.000 UFC/mL o "ausencia de crecimiento"

- Urocultivo Positivo: > 100.000 UFC/mL

- Urocultivo Dudoso: entre 1.000-100.000 UFC/mL

-  Cuando aparecen dos gérmenes distintos (o más): flora mixta, probable contaminación, repetir si procede.

En medio CLED:

   . Crecimiento azul: no fermenta la lactosa

   . Crecimiento amarillo: fermenta la lactosa

        - Colonias amarillas y fermentan lactosa: E.coli

        - Colonias incoloras o azules: Proteus

        - Colonias mucosas y fermentan lactosa: Klebsiella

LAMINOCULTIVO: 

• Objetivo: proporcionan un sistema adecuado, fácil de usar y económico para el control de higiene microbiológico tanto de superficies como de soluciones. Al tener dos caras con distintos medios, nos permite obtener doble información de la contaminación bacteriana. Se utilizan para controlar la contaminación microbiana de líquidos, por simple inmersión del laminocultivo en la muestra.

• Técnica:

1. Desenroscar el tapón del tubo y extraer la lámina soporte con los dos medios de cultivo. Evitar cualquier contacto del agar con los dedos o con cualquier superficie.

2. Según el material a examinar, proceder de la siguiente forma:
     . Líquidos: sumergir el laminocultivo en el líquido a muestrear. Eliminar el sobrenadante sacudiendo suavemente el laminocultivo o eliminar el líquido existente sobre el plástico con un papel absorbente.

3. Introducir el laminocultivo en su tubo original y enroscarlo. Identificar la muestra adecuadamente.

4. Incubar a 37°C durante 24-48 h. Para la investigación de hongos y levaduras, prolongar la incubación 24-48 horas adicionales a 25-30°C.

• Resultados: